試劑盒的各個操作步驟注意要點,珠式、管式及磁性球ELSIA,國外試劑均與特殊儀器配合應用,兩者均有詳細的使用說明,嚴格遵照規(guī)定操作,必能得出準確的結果。可用作ELISA測定的標本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。
試劑盒的使用規(guī)范如下:
1、樣本的收集及血清分離中要留意盡量防止細菌污染,一則細菌的成長,其所排泄的一些酶或許會對抗原抗體等蛋白發(fā)生分化作用;二則一些細菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶自身會對用相應酶作符號的測定辦法發(fā)生非特異性攪擾。
2、血清標本如是以無菌操作分離,則能夠在2~8℃下保存一周,如為有菌操作,則主張冰凍保存。樣本的長期保存,應在-70℃以下。
3、標本在保存中如呈現(xiàn)細菌污染所造成的的混濁或絮狀物時,應離心沉積后取上清檢測。elisa試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的試驗確診辦法。因為其試劑安穩(wěn)、易保存,操作簡便,成果判斷較客觀等要素,已廣泛應用在免疫學查驗的各領域中。
4、要留意防止呈現(xiàn)嚴峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有相似過氧化物的活性,因而,在以HRP為符號酶的測定中,如血清標本中血紅蛋白濃度較高,則其就很簡單在溫育進程中吸附于固相,然后與后邊參加的HRP底物反響顯色。
5、冰凍保存的血清標本須留意防止因停電等形成的重復凍融。試劑盒標本的重復凍融所發(fā)生的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子發(fā)生損壞作用,然后引起假陰性成果。此外,凍融標本的混勻也應留意,不要進行劇烈振動,重復倒置混勻即可。